高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography\HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。 历史 1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)首次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。
高效液相色谱法检测乳制品中的三聚氰胺 三聚氰胺(Melamine)是一种重要的三嗪类含氮杂环有机化工原料,
说实话,这种情况不是很正常。
因为紫外分光光度计和高效液相色谱的方法原理是一样的。所以两者测定出来的结果应该相差不多。
我觉得问题可能会出在实验方法上面。
比如紫外方法,你溶解样品时候所用的溶剂。还有高效液相方法的流动相和溶剂。比如说,我查到番茄红素不溶于水,难溶于强极性溶剂如甲醇、乙醇等,可溶于脂肪烃、芳香烃和氯代烃如乙烷、苯、氯仿等有机溶剂。那么你的溶剂选择是不是合理,是不是可以保证供试品可以在规定浓度中完全溶解。
或者是这个样品的溶液稳定性怎么样?如果是紫外方法还好,如果是高效液相,从配制样品到进样分析会有一段时间差。样品溶液稳定性不好的话,主成分就会降解。影响测定结果。
另外,就是两种方法都有同样的对照品吗?如果是要作比较,那么两种方法的对照品最好也都是同一来源,同一批次。
如果反复都查不到差异的理由,那么一般来说会默认为高效液相色谱法的结果更具有准确性。
是呀,你按检测器上的调零按钮调零就行了,如果还不行的话,就按工作站中的零点校正钮就行。
高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质,因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂,抗氧化剂、杀虫剂、除莠剂的分析等物质的分析.
用于高效液相色谱仪的检测器包括:紫外吸收检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器、差分折射率检测器、蒸发光散射检测器、质谱检测器等。
下面是对彼此的简要介绍。
高效液相色谱仪的光学类检测器
高效液相色谱仪的紫外吸收检测器广泛用于高效液相色谱,它需要对所测试的样品组分进行UV吸收,并且是选择性检测器。
高效液相色谱仪的二极管阵列探测器(DAD)是20世纪80年代出现的一种光学多通道探测器,扫描各洗脱组分的色谱图,经计算机处理,得到了色谱图与色谱图相结合的三维图谱。吸收光谱用于定性分析(以确定其是否为单一纯物质),色谱用于定量分析,并常用于复杂样品(如生物样品、中草药)的定性和定量分析。
高效液相色谱(HPLC)作为一种重要的分析技术,自问世以来在科学研究和工业应用中发挥着关键作用。本文将回顾高效液相色谱发展的历史,探讨其在不同领域的应用,以及展望未来的发展趋势。
高效液相色谱技术最初发展于20世纪60年代,由斯派尔斯(J. J. Kirkland)等人提出并逐步完善。与传统液相色谱相比,HPLC技术具有分析速度快、分辨率高、对样品准备要求低等优点,因此得到了广泛应用。
随着科学技术的不断进步,高效液相色谱在生命科学、环境监测、药物研发等领域得到了广泛应用。在生物药物分析中,HPLC可用于检测蛋白质、多肽等生物大分子,为药物研发提供重要支持。
作为一种高效、精准的分析技术,高效液相色谱在科学研究领域具有不可替代的地位。通过HPLC技术,科学家们可以快速准确地分析样品中的各种成分,为科学研究提供可靠数据支持。
例如,在药物代谢动力学研究中,研究人员通过HPLC技术可以检测药物及其代谢产物在生物体内的浓度变化,从而评估药物的安全性和有效性。
随着科学技术的不断发展,高效液相色谱技术也在不断创新和拓展。未来,我们可以期待以下几个方面的发展趋势:
高效液相色谱作为一种重要的分析技术,在科学研究、工业生产等领域具有广泛应用前景。通过本文的回顾与展望,我们可以更好地了解高效液相色谱的发展历程和未来可能的发展趋势,为相关领域的研究和实践提供参考。
在现代科学研究和实验室应用中,高效液相色谱软件扮演着至关重要的角色。随着科技的不断进步,传统的实验方法已经无法满足对复杂样品的分析需求,因此高效液相色谱软件的应用变得越发广泛。
高效液相色谱软件是一种专门用于高效液相色谱分析的计算机程序,它能够帮助研究人员快速、准确地分析样品中的化合物,提高实验效率。
一般来说,高效液相色谱软件具备以下几个主要功能:
相比传统的实验方法,使用高效液相色谱软件具有诸多优势:
高效液相色谱软件主要应用于以下领域:
总的来说,高效液相色谱软件在现代科学和实验室研究中扮演着不可或缺的角色。随着科技的不断发展,相信高效液相色谱软件的应用将会越来越广泛,为科研工作者带来更多便利和可能。希望本文对您有所帮助,谢谢阅读!
高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
操作步骤如下:
1). 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.
2). 对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3). 打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。
4). 进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
5). 有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。
6). 调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。
7). 设计走样方法。
8). 进样和进样后操作。
9). 关机时,先关计算机,再关液相色谱。
10). 填写登记本,由负责人签字。
11). 流动相均需色谱纯度,水用20m的去离子水。
12). 柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。
13). 所有过柱子的液体均需严格的过滤。
14). 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。
高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography\HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
该方法有效方便快捷地解决化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中得出想要的数据,成为重要的分离分析技术。
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