1. 充分脱蜡和水化。
脱蜡可以先60度20 min,再用二甲苯两次5~10 min;而水化用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,这些以便后面的结合反应充分、均匀。
2. 把握好细胞通透的时间。
一般根据切片的厚薄,选择蛋白酶k的孵育时间,常用10~30 min,几um切片用短时间;几十um切片用长时间,通过摸索达到既不脱片,有能够使后面的酶和抗体进入胞内。
3. 适当延长TUNEL反应液的时间。
一般是37度1h,你也可以根据你的凋亡损伤程度,选择更长的时间,可长至2 h,但要结合你最终的背景着色。
4. DAB显色条件的选择。
一般DAB反应10分钟左右,结合镜下控制背景颜色,最长不超过30 min;我不喜欢用promega公司提供的DAB液(桃红色),不利于辨认棕褐色。
5.PBS的充分清洗。
我个人认为,在TUNEL反应后和酶标反应后的清洗应十分严格,可增加次数达5次,因为这些清洗直接决定最后切片的非特异性着色。
6. 此外,内源性POD的封闭也十分关键。
对于肝脏、肾脏等血细胞含量多的组织,我的经验是适当延长封闭时间和升高过氧化氢的浓度,可以达到很好的封闭效果,且不影响最终的特异性染色。 南昌中洪博元技术部
一 结果观察注意三点,落射方式、分辨力投射以及滤光处理。具体为:
照明方式通常为落射 式,即光源通过物镜投射于样品上;
光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;
有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人眼。
二用tunel测凋亡的荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
tunel染色荧光是单互数值。而白光是双互数值。
TUNEL
abbr. transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-biotin nick end labeling 转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记;
[例句]The percentage of TUNEL positive cells was calculated under a fluorescent microscope.
在荧光镜下计数TUNEL阳性细胞的百分数。
tunel染色原理 细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。
DAPI染色原理,它 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。
原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA的3’-OH末端,用荧光显微镜即可观察结果。
tunel染色荧光是单互数值。而白光是双互数值。
tunel实验是主习数值。而彗星实验是副习数值。
一 结果观察注意三点,落射方式、分辨力投射以及滤光处理。具体为:
照明方式通常为落射 式,即光源通过物镜投射于样品上;
光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;
有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人眼。
二用tunel测凋亡的荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。
硬件检测作为计算机维护和故障排除中至关重要的一部分,是指通过软件或工具来检测计算机硬件设备是否正常工作或存在问题的过程。在日常使用计算机的过程中,由于硬件设备的老化、损坏或不匹配等原因,可能会导致计算机出现各种问题,因此进行硬件检测至关重要。本文将介绍硬件检测的几种常见方法,帮助用户更好地了解硬件检测的过程以及如何有效地进行硬件故障排查。
在Windows操作系统下,用户可以利用系统自带的工具进行硬件检测。例如,通过“设备管理器”可以查看计算机中各硬件设备的工作状态,是否存在异常情况;通过“性能监视器”可以实时监测CPU、内存、磁盘和网络等硬件资源的使用情况,帮助用户了解系统的整体运行状况;通过“Windows记事本”可以查看系统日志,了解系统运行中是否存在硬件故障或错误。
除了系统自带的工具外,用户还可以选择安装第三方硬件检测工具来进行更加全面和深入的硬件检测。这些工具通常能够检测硬件设备的型号、驱动版本、温度、电压等信息,并可以对硬件故障进行更加精准的诊断。一些知名的硬件检测工具包括CPU-Z、GPU-Z、MemTest86等,用户可以根据自己的需求选择合适的工具进行硬件检测。
对于一些较为复杂的硬件故障,用户还可以选择使用诊断卡进行排查。诊断卡是一种专门用于检测计算机硬件故障的工具,通过连接至主板上的PCI插槽或USB接口,可以对主板、CPU、内存、显卡等硬件进行全面的诊断。用户只需根据诊断卡提供的显示信息,即可快速确定硬件故障所在,帮助用户更快地解决硬件故障。
对于一些用户不方便安装软件的情况,还可以选择使用在线硬件检测工具进行硬件检测。这些在线工具通常无需安装,用户只需打开网页并连接至计算机,即可通过网页上提供的工具进行硬件检测。通过在线硬件检测工具,用户可以更加方便快捷地了解计算机硬件设备的工作状态,及时发现并解决硬件故障。
在进行硬件检测时,用户需要注意以下几点:
总之,硬件检测是保障计算机正常运行的重要环节,用户可以根据实际情况选择合适的硬件检测方法进行检测和故障排查。通过定期进行硬件检测,可以有效提高计算机的稳定性和可靠性,延长硬件设备的使用寿命,为用户的计算机使用提供更好的保障。
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