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流式细胞仪的基本工作原理是什么?

时间:2024-05-19 08:23|来源:未知|作者:admin|点击:0次

一、流式细胞仪的基本工作原理是什么?

我简单说一下:

1. 首先,机器吸取细胞混悬液,射入由鞘液(一般都是磷酸盐缓冲液)。由于鞘液的流速大,所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央,一般是单个细胞排队的形式。

2. 然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色,被激光照射后,会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱3. 根据激发光的强弱,来判断细胞和染色物质的结合情况,从而得到要检测的结果(比如抗原量,DNA量,等等)

二、流式细胞仪原理?

流式细胞仪的工作原理是:将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束,垂直照射在样品流上,被荧光染色的细胞在激光束的照射下,产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测,这种信号基本上反映了细胞体积的大小;荧光信号的接受方向与激光束垂直,经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离,形成多个不同波长的荧光信号。

这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度,经光电倍增管接收后可转换为电信号,再通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理,将分析结果显示在计算机屏幕上,也可以打印出来,还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。

检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达,其X轴为测量强度,Y轴为细胞数目。一般来说,流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数,这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据,既可以单独显示每个参数的直方图,也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。

细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体,充电后振动,使喷出的液流断裂为均匀的液滴,待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷,当液滴流经带有几千伏特的偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,不予充电的液滴落入中间的废液容器,从而实现细胞的分离。对分选出的细胞可以进行培养或其它处理,做更深的研究。

三、流式细胞仪检测的原理?

流式细胞仪检测是利用细胞对激光的反射和散射以及荧光染料的发射来识别和分析细胞的一种技术方法。其原理是将单个细胞通过喷嘴形成单个细胞液滴,液滴在激光束的照射下,细胞内染料吸收激光光源能激发荧光反应,荧光信号经过光电转换器转化为电信号后被传回电子计算机进行信号处理,利用参数分析仪将各项参数初步加工处理,最终通过比较筛选出目标细胞种群。流式细胞仪检测作为一种高效、快速、准确的细胞分析方法,可以在短时间内对细胞进行定量和定性分析,广泛应用于医学、生物学、免疫学、遗传学等领域。

四、流式细胞仪的原理是什么?

最近一直在了解流式细胞术和流式分选的知识,看到这个问题想回答一下:

流式细胞仪是以流式细胞术为基础,快速精确的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选。分析流程为:制备单细胞悬液,用特异性荧光染料标记的抗体进行染色,经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室,在鞘液的包裹下细胞呈单行排列,依次通过检测区域,在激光束的照射下细胞会产生散射光和激发荧光。这两种信号会同时被光电倍增管( PMT) 接收。接收后可转换为电信号,通过模/数转换器,将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号,进行分析。

如上所述,流式细胞仪是由液流系统、光路系统以及检测分析系统三部分组成,部分仪器还具有分选功能,能对粒子进行充电和偏转从而实现细胞分选。

液流系统:通过产生压力使含有目的细胞的样本快速进入仪器,在封闭的样品管中利用样品和鞘液之间的压力差是样本聚集到光学分析系统;

光路系统:由不同的激光器发射出的激光照射到细胞表面产生光信号,而后经过不同的光路系统被接收。在流式照射室的分析点,激光照射到细胞表面发生散射和折射,并发射出散射光包括前向散射光(FSC)和侧向散射光(SSC),同时细胞表面的荧光素被激发发射出荧光。前向散射光和侧向散射光检测器收集散射光转变为电信号;荧光则被聚光器收集,不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器,将荧光信号也转变成电信号。FSC和SSC是流式分析中两个非常基本的参数。FSC的值能代表细胞的大小,细胞的体积越大则FSC就越大。SSC则代表细胞的颗粒度,细胞内细胞器和颗粒度越大则SSC越大。

检测分析系统:荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度,光信号转换为可被计算机识别的电信号。计算机把所测量的各种信号进行处理分析。

流式细胞分选是在流式细胞术的基础上进行的。在流动室的喷口上方配有一个超高频的压电晶体,产生的振动使喷出的液流形成均匀的液滴,待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷(对标有荧光素的细胞液滴带以负电荷;未标记荧光素的细胞液滴带以正电荷;而不含有细胞的液滴则不被带电荷),当液滴流经偏转板时,在高压电场的作用下偏转,落入各自的收集容器中,不带电荷的液滴落入废液容器,从而实现细胞的分离。

第一次回答希望能帮到你,如有理解不当的地方,欢迎指正!

五、lvrt工作原理?

工作原理简单地说是铁芯可动变压器。它由一个初级线圈,两个次级线圈,铁芯,线圈骨架,外壳等部件组成。初级线圈、次级线圈分布在线圈骨架上,线圈内部有一个可自由移动的杆状铁芯。

当铁芯处于中间位置时,两个次级线圈产生的感应电动势相等,这样输出电压为零;当铁芯在线圈内部移动并偏离中心位置时,两个线圈产生的感应电动势不等,有电压输出,其电压大小取决于位移量的大小。

为了提高传感器的灵敏度,改善传感器的线性度、增大传感器的线性范围,设计时将两个线圈反串相接、两个次级线圈的电压极性相反,LVDT输出的电压是两个次级线圈的电压之差,这个输出的电压值与铁芯的位移量成线性关系。

六、rcbo工作原理?

  当正常工作时,不论三相负载是否平衡,通过零序电流互感器主电路的三相电流相量之和等于零,故其二次绕组中无感应电动势产生,漏电保护器工作于闭合状态。

如果发生漏电或触电事故,三相电流之和便不再等于零,而等于某一电流值Is。

Is会通过人体、大地、变压器中性点形成回路,这样零序电流互感器二次侧产生与Is对应的感应电动势,加到脱扣器上,当Is达到一定值时,脱扣器动作,推动主开关的锁扣,分断主电路。

七、ap工作原理?

  无线AP是使用无线设备(手机等移动设备及笔记本电脑等无线设备)用户进入有线网络的接入点,主要用于宽带家庭、大楼内部、校园内部、园区内部以及仓库、工厂等需要无线监控的地方,典型距离覆盖几十米至上百米,也有可以用于远距离传送,目前最远的可以达到30KM左右,主要技术为IEEE802.11系列。大多数无线AP还带有接入点客户端模式(AP client),可以和其它AP进行无线连接,延展网络的覆盖范围。

八、nfc工作原理?

是近场通信,顾名思义,它支持兼容设备之间的短距离通信。需要至少一个传输设备,和一个接收信号。一系列的设备可以使用NFC标准,并将被视为被动或主动。

九、fhev工作原理?

双离合器变速器在一个变速器中实现了两个手动变速器的 功能。 为了帮助您理解这句话的含义,我们可以回顾一下传统的 手动变速器的工作原理。

在使用标准换挡杆换挡的汽车中,如果驾驶员要从一个挡 位换到另一个挡位,他先要踩下离合器踏板。

此动作可以 操作一个离合器,使发动机与 变速器断开连接,中断输送 到变速器的动力。

然后,驾驶员使用换挡杆选择新的挡 位,这个过程涉及到将齿形联轴器从一个齿轮移动到另一 个不同大小的齿轮。 称为“同步器”的设备会让齿轮在结合 之前相匹配以防止磨齿。

一旦换入了新的挡位,驾驶员就 可以松开离合器踏板,从而使发动机重新连接到变速器, 并将动力传送给车轮。

由此可见,在传统的手动变速器中,从发动机到车轮没有 连续的动力输出。

在换挡的过程中,动力传送将从“有”到 “无”再到“有”进行变化,这样就会导致“换挡冲击”或“扭矩中 断”现象。

对于技术不熟练的驾驶员,这种现象会导致车上 的乘客在换挡过程中感到前后摇晃。

十、钻床工作原理?

钻床系指主要用钻头在工件上加工孔的机床。通常钻头旋转为主运动,钻头轴向移动为进给运动。钻床结构简单,加工精度相对较低,可钻通孔、盲孔,更换特殊刀具,可扩、锪孔,铰孔或进行攻丝等加工

2.钻床的工作方法

钻床的工作方法主要有两步

⑴对工件需要钻孔的地方进行准确定位

定位方式主要分为两种一种是刀具定位,一种是专用工具定位。(此方法定位精度极差不推荐使用)

刀具定位:刀具定位是用道具的和机床的回转中心来进行定位,刀具在旋转过程中与机床由一个回转中心,用其定位。(此方法定位精度极差不推荐使用)

专用工具定位:专用工具使用如顶尖之类的定位专用工具来进行定位的。

⑵对定位点进行钻孔

对已经进行过精确定位的点进行钻孔。

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