当前位置:主页 > 仪器原理

HPLC原理是什么?

时间:2024-05-30 22:15|来源:未知|作者:admin|点击:0次

一、HPLC原理是什么?

高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 原理及操作方法: 储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别。

二、hplc原理及操作?

高效液相色谱法的工作原理:

流动相通过高压泵进入系统,样品溶液通过注射器进入流动相,流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,经过两相反复吸附-解吸分配后,各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件,然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传送给记录器,数据以地图的形式打印出来。

高效液相色谱仪操作步骤:

1).过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜。

2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。

3).打开HPLC工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

4).进入HPLC控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

5).有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10ml/min。

6).调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,观察基线的情况。

7).设计走样方法。点击file,选取selectusersandmethods,可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法,点击newmethod。选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,根据需要而不同。选完后,点击protocol。一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2-5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading-inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。

8).进样和进样后操作。选定走样方法,点击start。进样,所有的样品均需过滤。方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

9).关机时,先关计算机,再关液相色谱。

10).填写登记本,由负责人签字。

三、hplc电表原理?

hplc电表的原理:

宽带电力线载波通信网络则是以电力线作为通信媒介,实现低压电力用户用电信息汇聚、传输、交互的通信网络。宽带电力线载波主要采用了正交频分复用(OFDM)技术,频段使用2MHz-12MHz。与传统的低速窄带电力线载波技术而言,HPLC技术具有带宽大、传输速率高,可以满足低压电力线载波通信更高的需求。

四、HPLC法的实验原理?

高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。希望能给大家带来帮助!

五、hplc载波通信原理?

hplc载波通信工作原理:

HPLC是高速电力线载波,也称为宽带电力线载波,是在低压电力线上进行数据传输的宽带电力线载波技术。宽带电力线载波通信网络则是以电力线作为通信媒介,实现低压电力用户用电信息汇聚、传输、交互的通信网络。宽带电力线载波主要采用了正交频分复用(OFDM)技术,频段使用2MHz-12MHz。与传统的低速窄带电力线载波技术而言,HPLC技术具有带宽大、传输速率高,可以满足低压电力线载波通信更高的需求。

六、hplc手性分离的拆分原理?

原理:被分析样品(气体或液体汽化后的蒸汽)在流速保持一定的惰性气体(成为载气或流动相)的带动下进入填充有固定相的色谱柱,在色谱柱中样品被分离成一个个的单一组分,并以一定的先后次序从色谱柱流出,进入检测器,转变成电信号,再经放大后,由记录器记录下来,在记录纸上得到一组曲线图(称为色谱图),根据色谱峰的峰高或峰面积就可以定量测定样品中各个组分的含量

七、hplc的工作原理和用途?

高效液相色谱法的工作原理:

流动相通过高压泵进入系统,样品溶液通过注射器进入流动相,流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,经过两相反复吸附-解吸分配后,各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件,然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传送给记录器,数据以地图的形式打印出来。

高效液相色谱法用途:

1.在环境分析中的应用:可用于环芳烃(PAHs)、农药残留分析等。

2.在食品分析中的应用:可用于食品营养分析、食品添加剂分析、食品污染物分析等。

3.在生命科学中的应用:生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学和生物化学中分子量物质的纯化、分离和测定可以从分子水平上进行研究。

4.在医学检查中的应用:体液中代谢物的分析和测定、药动学、临床药物监测等。

5.无机分析中的应用:阴离子和阳离子的分析等。

八、hplc实验中手动进样原理?

六通阀,不进样时,流动相直接流过六通阀;当进样后,搬动进样阀,样品被流动相带到流动系统中,然后,样品被流动相带着通过柱子,根据各成分分配比而不同进行分离,再流到检测器被检测。

九、hplc-ms原理和操作详解?

HPLC-MS的原理名词解释:试样通过液相色谱系统进样,由色谱柱进行分离,而后进入接口。在接口中,试样由液相中的离子或分子转变成气相离子,然后被聚焦于质量分析器中,根据质荷比而分离。最后离子信号被转变为电信号,由电子倍增器检测,检测信号被放大后传输至计算机数据处理系统,同时获得各种色谱、质谱数据。

1.将已经过滤并脱气的流动相注入储液罐;

2. 用流动相冲洗金属过滤器,然后将过滤器浸入储液罐的流动相中;

3. 将储液罐放置在一定的高度,以避免由于搬运和其他操作人员的移动而造成不必要的跌落。

4. 然后按以下顺序依次启动高效液相色谱仪:泵→检测器→高效液相色谱软件→按预先计划的方法设置软件参数,如分析时间、检测波长、流速等。

5. 启动泵,运行5分钟,主要是为了排除系统中的气泡,结束后关闭所有排气阀;

6. 然后按照预先计划的速度,以固定的速率,如1mL/min左右,运行流动相,走基线,直到基线平稳,就可以在计算机软件上进行监视;

7. 基线平稳后,在软件中设置样品的运行参数,如流速和分析时间等。分析时间会因样品、流速、柱长等因素变化。

8. 参数设置完毕后,将固定体积的样品溶液注入进样阀,然后在软件中启动注入命令,进样器中的样品溶液就随流动相进入色谱柱;

9. 通过软件监视各项读数,当检测器检测到样品所有峰值,停止运行并设置新的进样。在下一个样品分析前,建议留出5-10分钟,待流动相通过色谱柱,以便清洗之前样品的残留物;确认基线稳定后,进行下一次注射。

10. 分析结束后,先关闭检测器,然后关闭泵,最后关闭软件。

十、hplc手动进样的原理和要求?

hplc手动进样的原理:高效液相色谱以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析和分离。

Copyright © 2024 温变仪器 滇ICP备2024020316号-40