流式细胞仪的工作原理是：将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。
这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，也可以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。
检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据，既可以单独显示每个参数的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。
细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。对分选出的细胞可以进行培养或其它处理，做更深的研究。
流式细胞仪检测是利用细胞对激光的反射和散射以及荧光染料的发射来识别和分析细胞的一种技术方法。其原理是将单个细胞通过喷嘴形成单个细胞液滴，液滴在激光束的照射下，细胞内染料吸收激光光源能激发荧光反应，荧光信号经过光电转换器转化为电信号后被传回电子计算机进行信号处理，利用参数分析仪将各项参数初步加工处理，最终通过比较筛选出目标细胞种群。流式细胞仪检测作为一种高效、快速、准确的细胞分析方法，可以在短时间内对细胞进行定量和定性分析，广泛应用于医学、生物学、免疫学、遗传学等领域。
最近一直在了解流式细胞术和流式分选的知识，看到这个问题想回答一下：
流式细胞仪是以流式细胞术为基础，快速精确的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选。分析流程为：制备单细胞悬液，用特异性荧光染料标记的抗体进行染色，经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室，在鞘液的包裹下细胞呈单行排列，依次通过检测区域，在激光束的照射下细胞会产生散射光和激发荧光。这两种信号会同时被光电倍增管( PMT) 接收。接收后可转换为电信号，通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号，进行分析。
如上所述，流式细胞仪是由液流系统、光路系统以及检测分析系统三部分组成，部分仪器还具有分选功能，能对粒子进行充电和偏转从而实现细胞分选。
液流系统：通过产生压力使含有目的细胞的样本快速进入仪器，在封闭的样品管中利用样品和鞘液之间的压力差是样本聚集到光学分析系统；
光路系统：由不同的激光器发射出的激光照射到细胞表面产生光信号，而后经过不同的光路系统被接收。在流式照射室的分析点，激光照射到细胞表面发生散射和折射，并发射出散射光包括前向散射光（FSC）和侧向散射光（SSC）,同时细胞表面的荧光素被激发发射出荧光。前向散射光和侧向散射光检测器收集散射光转变为电信号；荧光则被聚光器收集，不同颜色的荧光被双色反光镜转向不同的光电倍增检测器，将荧光信号也转变成电信号。FSC和SSC是流式分析中两个非常基本的参数。FSC的值能代表细胞的大小，细胞的体积越大则FSC就越大。SSC则代表细胞的颗粒度，细胞内细胞器和颗粒度越大则SSC越大。
检测分析系统：荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原强度或细胞内物质的浓度，光信号转换为可被计算机识别的电信号。计算机把所测量的各种信号进行处理分析。
流式细胞分选是在流式细胞术的基础上进行的。在流动室的喷口上方配有一个超高频的压电晶体，产生的振动使喷出的液流形成均匀的液滴，待测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷（对标有荧光素的细胞液滴带以负电荷；未标记荧光素的细胞液滴带以正电荷；而不含有细胞的液滴则不被带电荷），当液滴流经偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不带电荷的液滴落入废液容器，从而实现细胞的分离。
第一次回答希望能帮到你，如有理解不当的地方，欢迎指正！
我简单说一下：
1. 首先，机器吸取细胞混悬液，射入由鞘液（一般都是磷酸盐缓冲液）。由于鞘液的流速大，所以细胞混悬液通过轴流的形式在中央，一般是单个细胞排队的形式。
2. 然后细胞通过检测窗口。有激光束照射。一般细胞都经过荧光染色，被激光照射后，会有不同波长的激发光产生。机器设有检测器来探测激发光的强弱3. 根据激发光的强弱，来判断细胞和染色物质的结合情况，从而得到要检测的结果（比如抗原量，DNA量，等等）
流式细胞仪主要用于检测细胞膜渗透性丶细胞核中DNA和RNA基因状况，以及做基因亲子鉴定等。
流式细胞仪（Flow cytometer ）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。
多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。
随着科学技术的不断进步和人们对细胞研究的需求日益增长，流式细胞仪作为一种用于分析和计数细胞的强大工具，已经被广泛应用于生命科学、医学、药物研发等领域。但是，随着时间的推移，流式细胞仪面临着一些挑战和限制，包括分析速度、精度和多维细胞信息的获取。为了克服这些限制并推动细胞分析技术的发展，科学家们正在不断寻求新的突破和创新。
未来发展的重点之一是提高流式细胞仪的分析速度和精度。当前的流式细胞仪在分析样本时需要离体操作，并且每次只能分析一种细胞类型。然而，随着技术的进步，研究人员希望开发出一种高通量的流式细胞仪，能够同时分析多种细胞类型。这将极大地提高细胞分析的效率和准确性，加快研究进程。为了实现这一目标，科学家们正在探索新的检测技术和数据分析方法，以便同时获取多维细胞信息，并实现高速、高通量的细胞分析。
另一个重要的发展方向是改进流式细胞仪的细胞分类和筛选能力。当前的流式细胞仪主要依靠细胞表面标记物进行分类和筛选，然而，一些细胞类型可能没有特定的表面标记物，或具有相似的表面标记物，这给细胞分类和筛选带来了困难。因此，研究人员正在努力寻找新的标记物或开发新的技术来提高分类和筛选的准确性。一种可能的方法是利用细胞的内部特征进行分类和筛选，例如细胞的形态特征、细胞器的组成等。通过结合多个细胞特征，科学家们可以更准确地区分不同的细胞类型，并实现对罕见细胞的高精度筛选。
此外，流式细胞仪的未来发展还包括优化数据分析和可视化方法。当前的流式细胞仪产生的数据量巨大，需要进行复杂的数据分析和解读。然而，许多研究人员在数据分析和解读方面缺乏专业知识和经验。为了解决这一问题，科学家们正在开发新的数据分析工具和算法，以简化数据分析流程并提供直观的可视化结果。这将有助于研究人员更全面地理解和解释细胞数据，并发现其中隐藏的规律和趋势。
在流式细胞仪未来发展的道路上，仪器的便携性和成本效益也是重要的考虑因素。当前的流式细胞仪通常较大且价格昂贵，限制了它们在一些领域的应用范围。为了推动流式细胞仪的普及和应用，研究人员正在努力开发小型、便携式的流式细胞仪，并降低其制造成本。这将使流式细胞仪更易于使用和获得，为更多的科研机构和医疗机构提供细胞分析的能力。
流式细胞仪作为一种重要的细胞分析工具，已经在许多科研领域发挥了重要作用。然而，随着科技的进步和对细胞分析技术的需求不断增长，流式细胞仪在分析速度、精度和多维细胞信息获取方面仍有待改进。未来的发展方向包括提高流式细胞仪的分析速度和精度、改进细胞分类和筛选能力、优化数据分析和可视化方法，以及提高仪器的便携性和成本效益。
通过不断的创新和突破，我们相信流式细胞仪将迎来新的发展篇章，为细胞分析和疾病研究带来更多的可能性和机会。
流式细胞仪得到的都是相对值。如果你的样本可以看到一个阳性和一个阴性群，那很容易分析，直接比较两个群的百分比就可以了。
如果这个细胞样本只有一个群，比较不同样本，那需要得出这个FITC-A的几个参数来比较，可以使用的参数一般有Median Fluorescence Intensity或者Mean Fluorescence Intensity。比较不同组的这个参数进行分析
看你用的什么机器好软件了，一些软件可以直接输出为PDF或者JEPG格式的图，还有可以输出FCS文件，再用第三方软件，比如flowjo来作图
MFI可以有几个意思，比如MeanFluorescenceIntensity或者MedianFluorescenceIntensity。根据你样本的分布，如果样本是正态分布，平均荧光强度和中位荧光强度应该是一致的。但是在非正态分布的样本，这两个值是不一样的。具体用哪一个，要看具体样本的分布。
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