单克隆抗体的原理是什么？

一、单克隆抗体的原理是什么？

动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，具有不同基因的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。

被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞（浆细胞）和记忆B细胞，大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。

如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

二、制备单克隆抗体的2个原理？

哈哈~我们刚考到这题

原理：

B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。

过程

1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。

2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。

3）细胞融合的关键:

1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。

2融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个干净的环境，以及适宜的无菌操作技术。

4）阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测，过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质，以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫荧光法等。其中ELISA法最简便，RIA法最准确。阳性克隆的筛选应进行多次，均阳性时才确定为阳性克隆进行扩增。

5）克隆化 克隆化的目的是为了获得单一细胞系的群体。克隆化应尽早进行并反复筛选。这是因为初期的杂交瘤细胞是不稳定的，有丢失染色体的倾向。反复克隆化后可获得稳定的杂交瘤细胞株。克隆化的方法很多，而最常用的是有限稀释法。

（1）显微操作法：在显微镜下取单细胞，然后进行单细胞培养。这种方法操作复杂，效率低，故不常用。

（2）有限稀释法：将对数生长期的杂交瘤细胞用培养液作一定的稀释后，按每孔1个细胞接种在培养皿中，细胞增值后成为单克隆细胞系。第一次克隆化时加一定量的饲养细胞。由于第一次克隆化生长的细胞不能保证单克隆化，所以为获得稳定的单克隆细胞株需经2～3次的再克隆才成。应该注意的是，每次克隆化过程中所有有意义的细胞都应冷冻保存，以便重复检查，避免丢失有意义的细胞。

（3）软琼脂法：将杂交瘤细胞稀释到一定密度，然后与琼脂混悬。在琼脂中的细胞不能自由移动，彼此互不相混，从而达到单细胞培养的目的。但此法不如有限稀释法好。

（4）荧光激光细胞分类法：用抗原包被的荧光乳胶微球标记杂交瘤细胞，然后根据抗原与杂交瘤细胞结合的特异性选出细胞，并进行单细胞培养。

6）细胞的冻存与复苏

7）大规模单克隆抗体的制备 选出的阳性细胞株应及早进行抗体制备，因为融合细胞随培养时间延长，发生污染、染包体丢失和细胞死亡的机率增加。抗体制备有两种方法。一是增量培养法，即将杂交瘤细胞在体外培养，在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备，一般应用无血清培养基，以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。最普遍采用的是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠，先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射，一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔中去。通常在接种一周后即有明显的腹水产生，每只小鼠可收集5～10ml的腹水，有时甚至超过40ml。该法制备的腹水抗体含量高，每毫升可达数毫克甚至数十毫克水平。此外，腹水中的杂蛋白也较少，便于抗体的纯化。

意义：

用于以下各种生命科学实验并具有医用价值

（1）沉淀反应：Precipitation reaction

（2）凝集实验：haemaglutination

（3）放射免疫学方法检测免疫复合物

（4） 流式细胞仪：用于细胞的分型和细胞分离。

（5）ELISA 等免疫学检测

（6）BIAcore biosensor:检测Ab-Ag或与蛋白的

亲和力 。

(7) 免疫印记（western blotting)

（8） 免疫沉淀：

（9） 亲和层析：分离蛋白质

（10） 磁珠分离细胞

（11）临床疾病的诊断和治疗；

三、单克隆抗体的制备原理是什么？

单克隆抗体技术原理如下：

由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。

单克隆抗体技术可用于探讨①蛋白质的精细结构；②淋巴细胞亚群的表面新抗原；③组织相容性抗原；④激素和药物的放射免疫（或酶免疫）分析；⑤肿瘤的定位和分类；⑥纯化微生物和寄生虫抗原；⑦免疫治疗和与药物结合的免疫-化学疗法 (“导弹”疗法,利用单克隆抗体与靶细胞特异性结合，将药物带至病灶部位。因此，单克隆抗体可直接用于人类疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究，为人类恶性肿瘤的免疫诊断与免疫治疗开辟了广阔前景。

四、单克隆抗体技术原理是什么？

单克隆抗体技术原理是被光探测器接收而产生光电流，再经过进一步放大后输出。这就完成了电—光—电的转换，从而起到输入、输出、隔离的作用。

由于光耦合器输入输出间互相隔离，电信号传输具有单向性等特点，因而具有良好的电绝缘能力和抗干扰能力。

所以，它在长线传输信息中作为终端隔离元件可以大大提高信噪比。

在计算机数字通信及实时控制中作为信号隔离的接口器件，可以大大提高计算机工作的可靠性。

五、单克隆抗体hat培养基筛选原理？

hat培养基是指选择培养基，在培养基中加了一种特殊的物质氨基喋呤，这个物质可以阻断DNA复制的D途径。由于骨髓瘤细胞DNA复制只有D途径，所以不能在这种培养基中生存。而已免疫的B淋巴细胞DNA复制除了D途径还有S途径，但是由于B淋巴细胞不能无限增殖也被淘汰了。

而杂交瘤细胞既具备的瘤细胞无限增殖的特点又具备B淋巴细胞DNA复制的S途径可以在选择培养基上生存。

六、单克隆抗体怎么自动导向?是运用什么原理？

单克隆抗体可以与同位素、毒素、药物结合使用，结合后，由于单克隆抗体是一种特异性抗体，灵敏度高、特异性强，所以他能定向的将药物带到所需部位，从而起到定向导向的作用。

运用的是单克隆抗体是特异性抗体，且特异性强、灵敏度高的原理。

七、高中生物！制备单克隆抗体原理？

从经过特异性免疫的实验动物体内提取B细胞

用动物细胞融合的方法将B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞

用特定的选择性培养基筛选出能够无限增殖并产生特异性抗体的杂交瘤细胞

进行体内或体外培养。体内培养就是将杂交瘤细胞注入实验动物腹腔，将来从腹水中提取。体外培养，就是利用动物细胞培养的方法，将来从培养液中提取

单克隆抗体的优点是：特异性强、灵敏度高，并可大量制备

八、单克隆抗体技术的发展

单克隆抗体技术的发展：致力于改善生物医药领域的治疗手段

单克隆抗体技术作为生物医药领域的重要突破，为疾病的治疗提供了更为精准和有效的手段。随着科技的进步和不断的创新，单克隆抗体技术已经在临床应用中取得了巨大的成功，并且对于许多疾病的治疗带来了希望。

什么是单克隆抗体技术？

单克隆抗体技术是一种通过体外重组技术获得的抗体，与人体免疫系统产生的自然抗体相似。它具有高度的特异性和亲和性，能够精确地识别并结合特定的抗原，从而起到调控和干预疾病发展的作用。

单克隆抗体技术的核心是通过对于抗体的基因工程修改和重组，产生具有一致性结构和功能的抗体。与传统的多克隆抗体相比，单克隆抗体具有以下几个优点：

• 单克隆性：单克隆抗体来源于同一克隆的B细胞，具有高度的一致性和稳定性。
• 特异性：单克隆抗体能够精确地识别和结合目标抗原，避免了对其他细胞、组织或抗原的非特异性反应。
• 亲和性：单克隆抗体具有高亲和力，能够更有效地结合抗原。
• 低免疫原性：单克隆抗体与人体免疫系统更为接近，降低了免疫反应的可能性。

单克隆抗体技术的应用领域

单克隆抗体技术的应用领域非常广泛，涉及医药、生物学、疾病诊断和治疗等多个领域。

药物研发：单克隆抗体技术在药物研发中发挥着重要的作用。通过针对特定的抗原进行单克隆抗体的筛选和优化，可以获得更为有效和安全的药物，用于疾病的治疗。

肿瘤治疗：单克隆抗体技术被广泛应用于肿瘤的治疗。通过设计和制备针对肿瘤细胞表面标志物的单克隆抗体，可以实现对肿瘤细胞的特异性识别和靶向治疗，减少对正常细胞的损害。

免疫疗法：单克隆抗体技术为免疫疗法提供了重要的工具和手段。通过修改和设计单克隆抗体的结构，可以增强其免疫效应，并促进机体免疫系统对抗疾病的能力。

疾病诊断：单克隆抗体技术在疾病的诊断中也具有重要的应用价值。通过将荧光物质或放射性同位素标记于单克隆抗体上，可以实现对疾病标志物的灵敏检测和定量分析，提高疾病的早期诊断和预后判断。

单克隆抗体技术的挑战和前景

虽然单克隆抗体技术取得了长足的发展，但仍然存在一些挑战阻碍其更广泛的应用。

制备技术：单克隆抗体的制备技术仍然需要不断地完善和创新。如何提高单克隆抗体的产量和纯度，降低制备成本，是制备技术面临的主要挑战。

免疫原性：单克隆抗体的免疫原性是制约其应用的重要因素。尽管相对于多克隆抗体而言，单克隆抗体具有较低的免疫原性，但仍然可能引发一定的免疫反应。

安全性：单克隆抗体的长期安全性也需要进一步的研究和验证。随着单克隆抗体的广泛应用，我们需要更全面、深入地了解其对人体的影响和潜在风险。

尽管面临一些挑战，单克隆抗体技术仍然具有广阔的前景。

个性化治疗：单克隆抗体技术可以为个体化治疗提供更多选择。通过对患者个体特征的分析和评估，可以定制适合患者疾病的单克隆抗体药物，提高治疗效果并减少副作用。

新药开发：单克隆抗体技术的快速发展为新药的开发提供了更多机会。新一代的单克隆抗体药物不仅在疾病治疗中具有巨大潜力，还为药物研发带来了新的思路和方法。

疾病防控：单克隆抗体技术不仅在疾病治疗中有着重要的意义，也可以在疾病防控中发挥关键作用。通过研究和开发针对疾病相关抗原的单克隆抗体，可以实现对病原微生物的精确识别和有效阻断，保护人群免受疾病的侵害。

结论

单克隆抗体技术的发展为生物医药领域带来了巨大的希望和机遇。通过精确识别和有效干预疾病发展的能力，单克隆抗体技术为我们提供了新的治疗方式。尽管仍然面临一些挑战，但单克隆抗体技术有着广阔的前景，在未来的研究和应用中将会发挥更大的作用。

九、单克隆抗体的优点？

单克隆抗体有多种优点。单克隆抗体具有很强的特异性，能够特异性地结合特定的抗原，避免了混杂污染和交叉反应，因此具有很高的应用价值。内如延伸：1. 单克隆抗体具有高度的一致性和稳定性，使得其作为药物、生物传感器、免疫组化试剂以及疫苗等方面的应用有着广泛的前景。2. 与多克隆抗体相比，单克隆抗体也可以被用于更加复杂的实验和研究中，例如免疫沉淀和分离等领域。3. 此外，单克隆抗体还有很好的分子工程创新和技术升级空间，被认为是未来生物技术和生物医学研究领域的重要发展方向。

十、单克隆抗体本质？

定义：由单一杂交瘤细胞克隆分泌的只能识别一种表位（抗原决定簇）的高纯度抗体。原理：动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。

当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。

被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞（浆细胞）和记忆B细胞，大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。