pcr荧光探针法？

一、pcr荧光探针法？

实时荧光定量PCR （Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。·

所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

二、pcr探针法原理？

其原理为：光照射到某些原子时，光的能量使原子核周围的一些电子由原来的轨道跃迁到了能量更高的轨道，即从基态跃迁到第一激发单线态或第二激发单线态等。

第一激发单线态或第二激发单线态等是不稳定的，所以会恢复基态，当电子由第一激发单线态恢复到基态时，能量会以光的形式释放，所以产生荧光。

三、pcr荧光探针法优缺点？

pcr荧光探针法优点：该技术 具有实时监测、快速、灵敏、精确等特点, 是对原有 PCR 技术的革新, 扩大了 PCR 的应用范 围。

缺点:①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)②不同厂家生产的试剂盒质量差异...

四、pcr荧光探针法怎么取样？

荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链，它都掺。

而探针法是当探针结合到目标序列上以后，聚合酶降解探针后，探针上自带的荧光基团离开淬灭基团，从而发出荧光。

从两者的原理上来看，不难判断，荧光PCR法更加简单方便，而且成本低。而探针法特异性更强。所选序列应该高度特异。应该选择具有最小二级结构的扩增子。这是很重要的，因为二级结构会影响反应效率。在任何实时应用中期望获得100%的扩增反应效率，这意味着每次循环中，体系内的扩增子都有两倍的增加。

五、荧光pcr原理？

荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；刚开始时, 探针结合在DNA任一一条单链上;PCR扩增时，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

六、pcr荧光探针法什么意思？

在紫外-可见-近红外区有特征荧光，并且其 荧光性质（激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等）可随所处环境的性质，如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。

七、pcr荧光探针法多久出结果？

目前，最快的新型冠状病毒核酸检测采用荧光PCR法，只需要30分钟即可出结果，相比疫情刚爆发时，现在的检测速度已经较为快速。

缩短检测时间可更好地避免疫情传染。该方法在2020年1月28日通过了国家药品监督管理局审批，可以投入使用。但是由于此次疫情感染人员较多，而资源却有限，不建议无明显症状的疑似患者至医院做检测，可在家隔离观察。

一是为了节约资源，让真正需要检测的人群能被检测，另外可避免在医院发生交叉感染。

八、荧光定量pcr原理？

荧光定量PCR是一种基于PCR技术的、灵敏、精确、可定量检测DNA的方法。其原理是，在PCR过程中加入荧光染料，当靶基因扩增到一定数量时，荧光信号达到了可检测的阈值，就可以通过荧光信号的强度来定量检测目标基因的存在量。荧光信号的增长可以直接反映PCR产物的数量，可以准确计算出靶基因的起始浓度。此外，该技术还可以通过不同荧光染料的选择，实现多靶点同时检测，从而提高检测效率。总之，荧光定量PCR技术的原理是通过荧光信号来实现基因数量的定量测定，具有高灵敏度、高精度和高通量等优点，是现代生物技术和生物医学研究中重要的实验手段之一。

九、pcr荧光探针法是什么意思？

荧光定量PCR法检测的是SYBR Green掺入到双链DNA中的量。SYBR Green掺入到双链DNA中后会发出荧光。但是只要是双链,它都掺。 而探针法是当探针结合到目标序列上以后,聚合酶降解探针后,探针上自带的荧光基团离开淬灭基团,从而发出荧光。

十、实时荧光定量PCR的原理？

荧光定量 PCR 最早称 TaqMan PCR ，后来也叫 Real-Time PCR ，是美国 PE （ Perkin Elmer ）公司 1995 年研制出来的一种新的核酸定量技术。

该技术是在常规 PCR 基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。

其原理：随着 PCR 反应的进行， PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。

每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。