流式细胞技术检测目的？

一、流式细胞技术检测目的？

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成。临床中运用流式细胞仪进行外周血白细胞、骨髓细胞以及肿瘤细胞等的检测是临床检测的重要组成部分。

二、流式细胞仪检测的原理？

流式细胞仪检测是利用细胞对激光的反射和散射以及荧光染料的发射来识别和分析细胞的一种技术方法。其原理是将单个细胞通过喷嘴形成单个细胞液滴，液滴在激光束的照射下，细胞内染料吸收激光光源能激发荧光反应，荧光信号经过光电转换器转化为电信号后被传回电子计算机进行信号处理，利用参数分析仪将各项参数初步加工处理，最终通过比较筛选出目标细胞种群。流式细胞仪检测作为一种高效、快速、准确的细胞分析方法，可以在短时间内对细胞进行定量和定性分析，广泛应用于医学、生物学、免疫学、遗传学等领域。

三、流式细胞仪FACSVerse可以检测什么抗体？

流式细胞仪FACSVerse可以检测（单克隆抗体）。仪器适用范围：流式细胞仪结合定量荧光细胞化学方法，单克隆抗体和免疫荧光染色原理和技术，对快速流动液体中的单细胞的多种参数进行细胞定性和定量分析以及细胞分选纯化。应用于细胞周期和DNA倍体分析、凋亡检测、细胞免疫表型分析、细胞因子的测定等方面。

四、如何用流式细胞仪检测GFP的表达？

一般流式细胞仪都有FITC通道,GFP可以用该通道来测量.用同一细胞系的转染了无GFP质粒的细胞做阴性对照,设置阈值.

五、用流式细胞仪检测各个象限的意义？

左上象限为坏死细胞，左下象限为正常细胞，右上象限为早期凋亡细胞，右下象限为晚期凋亡细胞。

六、流式细胞仪检测有个设门法.怎样设门？

所谓的门，在流式细胞仪检测的时候术语叫做gate。流式细胞仪是针对细胞（后者颗粒）的群来做研究的。往往是先选中感兴趣的一个细胞群，再分析下一步的染色，可以进行很多分级。

比如先从所有细胞中画出淋巴细胞，可以在FSC-SSC散点图上画出淋巴细胞的群，比如一个方框，或者任意曲线的gate，也就是所谓的门。把淋巴细胞括在内。然后在另外一个散点图上只显示这个gate里的细胞，但是把横坐标和纵坐标改为其他荧光标记。总之，门就是一个选择细胞群的手段。

七、凋亡流式细胞仪检测需要多少目的筛网筛细胞？

根据你细胞的大小和机器的要求了。目的是不会到时机器的管路堵塞就好。比如70微米之类的就好了。

上机后，要设置单细胞门来排除非单细胞的信号，建议使用SSC-W加SSC-H。

八、流式细胞染色步骤？

流式细胞染色： 1500rpm离心5min，弃上清，以3mL的PBS洗涤一次，加入400uL的CCAA溶液（PI染液，engreen），100ulRNase A（100ug/mL ），4℃避光孵育30min。  

九、流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测？

流式可以检测的样本很多：细胞表面的蛋白，通过荧光抗体直接标记细胞内部的蛋白，细胞固定，通透后再用荧光抗体识别细胞内部的DNA含量，细胞固定，通透后加DNA染料细胞内部钙离子浓度，直接加钙离子浓度荧光染料染色细胞内部线粒体膜电位，比如JC-1，罗丹明染料使用微球阵列，可以同时检测溶液中数十种可溶性蛋白的浓度

十、流式细胞仪原理？

流式细胞仪的工作原理是：将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。

这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，也可以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。

检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据，既可以单独显示每个参数的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。

细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。对分选出的细胞可以进行培养或其它处理，做更深的研究。