菌落总数检测方法？

一、菌落总数检测方法？

菌落总数的检测方法：一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液，然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合，在一定温度下，培养一定时间后（一般为48小时），记录每个平皿中形成的菌落数量，依据稀释倍数，计算出每克（或每ml）原始样品中所含细菌菌落总数。

基本操作一般包括：样品的稀释－－倾注平皿－－培养48小时－－计数报告。

二、纯化水菌落总数的检测方法？

2010版《中国药典》对纯化水微生物的要求是＜100个/1ml。以下是检测方法：薄膜过滤法,计数,每1ml纯化水不得过100个,具体方法：1、大肠菌群的检查：取含培养基10ml的乳糖胆盐发酵管若干支,分别加入供试水样1ml.另取乳糖胆盐发酵培养基管1支加1ml洗液为阴性对照组,于36±1℃培养18～24h.阴性对照应无菌生长.供试品乳糖胆盐发酵管若无菌生长,或有菌生长但不产酸产气或产酸不产气,判该管未检出大肠菌群.2、霉菌及酵母菌计数：纯化水取水样1ml,均做平行,并做阴性对照,经直径为50mm、孔径0.45μm的薄膜过滤器过滤,小心取出滤膜,菌面向上贴于玫瑰红钠培养基平板上,将培养皿倒置于培养箱中,于23～28℃培养5天（可延长到7天）,菌落计数；细菌计数：纯化水取水样1ml,并做阴性对照,经直径为50mm、孔径0.45μm的薄膜过滤器过滤,小心取出滤膜,菌面向上贴于营养琼脂培养基平板上,将培养皿倒置于培养箱中,于30～35℃培养72h,菌落计数3、判定标准：纯化水每片滤膜上微生物菌落总数不超过100cfu,不得检出大肠菌群

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三、土壤能检测菌落总数吗？

我想可以把土壤按一定比例和无菌水混匀，滴加在培养基的表面，应该可以计出来。

四、肉制品菌落总数检测步骤和技术方法？

按釆样程序，挑取少许试样于无菌培养皿中培养，大约18一24小时，取出后按镜检要求测定即可。

五、室内空气中菌落总数的检测方法？

检测空气中细菌总数的方法：撞击法　　原理：采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上,经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。 

六、检测菌落总数时，菌落蔓延生长怎么回事？

这实际上是因为接种的样品中含有迁徙性生长的细菌，而产生的一种正常现象。当然，有迁徙性生长的细菌，自然是妨害菌落计数的，因此如果迁徙范围不大没有超过一半，可以计数另一半的菌落总数并乘以二，如果迁徙范围大，只能以其他稀释度来计算了。

七、食品菌落总数检测有大片的菌要不要计入菌落总数？

　　根据现行国标《GB 47892-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》： 　　其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数； 若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。

八、水质检测菌落总数哪来的？

我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌，GB5749-85《中华人民共和国国家标准

生活饮用水卫生标准》规定，生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。

在某些情况下，水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量，除采用大肠菌群等指标外，一般还采用细菌总数这个指标。我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准

生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。

二、水质微生物检验方法

GB5750-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。

（一）细菌总数的检测：

国家标准中，细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。

对生活饮用水，直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养24h，进行计数。

对水源水，根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液1ml，加注平皿，营养琼脂混匀，37℃培养24h，进行计数。

按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。

（二）总大肠菌群的检测：

国家标准中，利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。

国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。

多管发酵法检测总大肠菌群，分为三步：初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。初发酵试验，采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h，观察产酸产气情况。对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验，并根据标准所附检数表报告结果。

其中，对生活饮用水，初发酵试验接种水样总量300ml，即100ml接种2管，10ml接种10管，采用两个稀释度，12支发酵管。对水源水，初发酵试验接种水样总量55.5ml，即10ml接种5管，1ml接种5管，0.1ml接种10管，共采用三个稀释度，15支发酵管。两种接种方法，所用的检数表是不同的。

滤膜法检测总大肠菌群，就是利用微孔滤膜，过滤一定量水样，将水样中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜帖放在选择性培养基上（如品红亚硫酸钠培养基），经培养和证实试验后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

九、菌落总数的计算方法？

菌落总数计算方法

1、具体操作方法

（1）培养到一定时间后，计算每个平板上的菌落数。可用肉眼观察，必要时可以使用放大镜检查。记下各平板的菌落总数后，求出同稀释度的各平板平均菌落数，计算出原始样品中每克（或每毫升）中的菌落数。

（2）到达规定培养时间后，应当立即计数。如果不能立即计数，应将平板放置于0-4℃的环境下，且不得超过24小时。

2、菌落数选择

（1）当平板上面有链状菌落生长，如果呈链状生长的菌落之间没有任何明显界限，则应作为一个菌落计算；如存在有几条不同来源的链，则每条链均应按一个菌落计算，不能把链上生长的每一个菌落分开计数。

（2）当平板上面有片状菌落生长，该平板一般不宜采用，如果片状菌落不到平板的一半，而另一半又分布均匀，则可以使用半个平板的菌落数乘以2代表全平板的菌落数。

（3）当平板内的菌落数过多（即所有稀释度均大于300时），但分布很均匀的时候，可取平板的一半或四分之一计数，再乘以相应稀释倍数作为该平板的菌落数。

（4）不同稀释度的菌落数应与稀释倍数成反比（同一稀释度的二个平板的菌落数应基本接近），即稀释倍数愈高菌落数愈少，稀释倍数愈低菌落数愈多。如果出现逆反现象，应视为检验中的差错，不作为检样计数报告的依据。

3、稀释度选择

（1）计数时应选取菌落数在30-300之间，无蔓延菌落生长的平板（SN标准要求为25-250个菌落），然后乘以稀释倍数进行报告。

（2）如果稀释度均大于300，则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

（3）如果稀释度均小于30，则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告。

（4）如果菌落数有的大于300，有的又小于30，但均不在30-300之间，则应以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告。

（5）如果所有稀释度均无菌落生长，则应按小于1乘以最低稀释倍数报告。

（6）如果2个稀释度均在30-300之间，按国家标准方法要求应以二者比值决定，比值小于或等于2时取平均数，比值大于2则选择较小数字。

（7）如果只有一个稀释度平板上的菌落数在30-300之间，应当计算两个平板菌落数的平均值，然后根据平均值乘以相应稀释倍数进行计算。

4、报告

（1）当菌落数在1-100以内时，按照实际数字进行报告。如果菌落数大于100时，报告前2位有效数字，第3位数四舍五入计算。

（2）固体检样以克为单位报告，液体检样以毫升为单位报告，表面涂擦则以平方厘米为单位报告。

十、菌落总数的检验方法？

基本操作一般包括：样品的稀释——倾注平皿——培养48（24）小时——计数报告。

1、菌落总数

食品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1mL （或1g）检样中形成菌落的总数。

按国家标准方法规定，即在需氧情况下，37℃培养48h，能在平板计数琼脂平板上生长的细菌菌落总数，所以厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌，由于现有条件不能满足其生理需求，故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数，菌落总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。