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革兰染色的原理?

时间:2024-05-01 03:00|来源:未知|作者:admin|点击:0次

一、革兰染色的原理?

1.原理 革兰氏染色的原理尚未完全阐明.目前主要有细菌等电点\化学结构及细胞膜通透性等三种学说:

(1)革兰氏阳性菌等电点在PH2~3,比阴性菌(PH4~5)为低.因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌强.

(2)革兰氏阳性菌含有核糖核酸镁盐,易和结晶紫-碘复合物结合而不易脱色.

(3)革兰氏阳性菌细胞壁及细胞膜的通透性较低.因此,染料和碘的复合物不易为乙醇所溶出.

所以阳性菌仍保持原来的紫色,而阴性菌染成的紫色可被酒精脱掉后复染成红色.

二、革兰染色的原理是什么?

原理是革兰氏阳性菌和阴性菌在化学和生理性质上差别比较大,染色体的反应也不一样,一般阳性菌和碘和结晶紫的复合物结合比较牢固,不容易脱色,而阴性菌的结合相对比较弱,容易脱色。

通过此染色法可区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌

三、革兰染色原理?

革兰氏染色法的原理是革兰氏阳性菌和阴性菌在化学和生理性质上差别比较大,染色体的反应也不一样,一般阳性菌和碘和结晶紫的复合物结合比较牢固,不容易脱色,而阴性菌的结合相对比较弱,容易脱色。通过此染色法可区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

四、革兰染色原理步骤和结果?

革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。

结果:革兰氏阳性菌呈蓝紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌在化学组成和生理性质上有很多差别。

现在一般认为革兰氏阳性菌体内含有特殊的核蛋白质镁盐与多糖的复合物。它与碘和结晶紫的复合物结合很牢,不易脱色,阴性菌复合物结合程度底,吸附染料差,易脱色,这是染色反应的主要依据。

五、革兰染色的原因?

1 革兰染色是一种常见的细菌染色方法。2 其原因是由于细菌细胞壁不同,革兰阳性菌具有较厚的层状的胞壁,革兰阴性菌胞壁相对较薄,且呈现双层结构,因此它们在染色时会有不同的反应。3 此外,革兰阴性菌的另一个特征是其胞外膜上含有的脂多糖,这种物质可吸附染色液中的颜料,令其不易被去除,从而作为对比显色剂呈现出红色,而革兰阳性菌则由于胞壁脆弱较易被破坏,再乙醇处理后无法抵挡染色液去除,因而呈现蓝色。

六、单染色法和革兰染色法的原理?

革兰氏染色法的原理: 简单来说:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,再用95%乙醇脱色。

具体来说:通过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物,革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密,故遇乙醇脱色处理时,因失水反而使网孔缩小,再加上它不含类脂,故乙醇处理不会出现缝隙,因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内,使其仍呈紫色; 而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出,因此通过乙醇脱色后仍呈无色,再经沙黄等红色染料复染,就使革兰氏阴性菌呈红色。

G﹢菌:细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性屏障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔隙缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。

Gˉ菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红染液复染后呈红色。

七、革兰染色和he染色区别?

革兰染色和he染色应用范围不同,染色原理不同。

HE染色:

苏木精 — 伊红染色法 苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

原理易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。

构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。

脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷的阳离子结合使胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明对比。伊红是细胞浆的良好染料。

由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。

革兰氏染色

革兰氏染色是细菌学中广泛使用的一种重要的鉴别染色法,属于复染法。初染剂结晶紫进行初染,再用碘液媒染,然后用乙醇(或丙酮)脱色,最后用复染剂(如番红)复染。经此方法染色后,细胞保留初染剂蓝紫色的细菌为革兰氏阳性菌;如果细胞中初染剂被脱色剂洗脱而使细菌染上复染剂的颜色(红色),该菌属于革兰氏阴性菌。

革兰氏染色法所以能将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性,是由这两类细菌细胞壁的结构和组成不同决定的。实际上,当用结晶紫初染后,像简单染色法一样,所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。碘作为媒染剂与结晶紫结合成结晶紫一碘的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时,两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,壁厚、类脂质含量低,用乙醇(或丙酮)脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的蓝紫色。革兰氏阴性菌则不同,由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高,所以当脱色处理时,类脂质被乙醇(或丙酮)溶解,细胞壁透性增大,使结晶紫-碘的复合物比较容易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的红色。

八、革兰染色的意义是?

革兰染色法的实际意义:鉴别细菌、选择用药、致病特点

根据细菌的细胞壁上的成分不同,用革兰氏染色方法可将细菌分为革兰氏(+)菌与革兰氏(-)菌两大类。根据细菌的革兰氏染色性质,可以缩小细菌的鉴定范围,有利于进一步分离鉴定细菌的类别,对疾病作出诊断。革兰氏(+)菌和革兰氏(-)菌,对抗生素也表现出不同的敏感性。一般革兰氏(+)菌对青霉素类、第1代头孢菌素、第2代头孢菌素、万古霉素、克林霉素等高度敏感;革兰氏(-)菌主要是对第3代头孢菌素、氨基糖苷类、碳青霉烯类敏感。革兰氏(+)菌和革兰氏(-)菌两者的致病作用也不同,革兰氏(+)菌主要是产生外毒素,革兰氏(-)菌是产生内毒素。

九、革兰染色的实验现象?

如果将细菌做革兰染色,凡是染后菌体呈蓝紫色的,称为“革兰阳性菌”;菌体是伊红色,称“革兰阴性菌”。无论阳性菌还是阴性菌,都有杆菌和球菌。葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌是临床最为常见的病原菌,葡萄球菌属于革兰阳性菌,大肠杆菌属于革兰阴性菌中的肠杆菌科,除大肠杆菌以外,临床较常见的肠杆菌科细菌还有变形杆菌属,沙门菌属、克霉白菌属;铜绿假单胞菌是临床常见的较耐药革兰阴性杆菌。

十、革兰染色所用的染色剂是?

革兰染色试剂,产品性能结构及组成RA1丙酮番红溶液:番红O,缓冲剂,丙酮/酒精;

RA2番红溶液:番红O,缓冲剂,酒精;RA3丙酮品红溶液:基础品红,缓冲剂,丙酮/酒精;RA4品红溶液:基础品红,缓冲剂,酒精;RB碘试剂:碘剂,聚乙烯吡咯烷酮,软化水;RC结晶紫溶液:结晶紫,酒精,防腐剂,软化水。产品有效期:15-25℃,6个月。

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