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胶体金法检测原理?

时间:2024-05-31 05:07|来源:未知|作者:admin|点击:0次

一、胶体金法检测原理?

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。

这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。

二、农残胶体金检测原理?

农残胶体金检测是一种基于胶体金技术的快速检测方法,适用于农产品中农药残留的检测。

其原理是利用胶体金颗粒的性质,将检测样品中的农药残留与特定的抗体结合,从而使胶体金颗粒发生聚集或分散,进而改变其表面等离子共振吸收峰的位置和强度。通过测量这些变化,可以判断样品中是否存在目标农药残留,并且可以定量测定其浓度。

具体来说,农残胶体金检测主要分为以下几个步骤:

样品处理:将待测样品进行提取和净化处理,以去除干扰物质和提高检测灵敏度。

抗体标记:将与目标农药残留具有高度特异性的抗体标记在胶体金颗粒表面。

检测操作:将标记好的胶体金溶液与样品混合,使抗体与待测样品中的农药残留结合,从而发生胶体金颗粒的聚集或分散。

结果判定:通过观察胶体金颗粒的表面等离子共振吸收峰的位置和强度的变化,可以判断样品中是否存在目标农药残留,并且可以定量测定其浓度。

农残胶体金检测具有操作简便、快速、高灵敏度和高特异性等优点,已经成为农产品中农药残留检测的重要手段之一。

三、胶体金层析法检测原理?

检测原理是:

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成定大小的金颗粒,并由于静电作用成为种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物性。

四、胶体金原理?

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。

这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。

五、胶体金捕获法原理?

胶体金是氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,金离子还原后聚合成的一定大小的金颗粒,它由一个基础的晶核(11个金原子形成的二十面体)和包围在外的双离子层构成(内层为负离子层AuCl2-,外层是带正电荷的H+)。

由于静电作用,金颗粒之间相互排斥而悬浮成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,故称胶体金。

胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

除了与蛋白质结合以外,它还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。

根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。用于胶体金标记的蛋白必须要经过前处理,其目的在于

(1)去除高浓度的盐分,高浓度的盐分往往干扰蛋白与胶体金的吸附结合,或导致胶体金粒子的凝聚,这一步往往采用低浓度缓冲液中进行。

(2)使蛋白分子尽量分散为单体,冻干蛋白或高浓度蛋白溶液中蛋白分子往往凝聚为多聚体大分子,可同时与多个胶体金粒子结合,影响标记的灵敏度和定量分析。

(3)使蛋白具有适当的分子量。蛋白分子量过小(30kD),形成的蛋白复合体往往是不稳定,可短时间内失活。

而分子量过大时,被认为影响探针的灵敏度,特别是已知蛋白的结构与活性中心的情况下,去除对活性影响的结构部分是提高标记灵敏度,延长探针寿命(防止凝集)的有效办法。

把分子量过小的蛋白与其它蛋白(如牛血清蛋白等)结合后,能制备出稳定性更佳的探针。

当蛋白前处理完成后,接着要确定胶体金与蛋白结合的最佳pH值。对于理化性质不确定的蛋白这一步尤为重要。

过量的蛋白与不同pH值得胶体金结合后,只有某一特定pH值能够形成结合最稳定的探针。在高浓度电解质(如NaCl)作用下不会凝

聚。不同蛋白的适宜pH范围的宽窄大不相同。一般选择最小适宜pH值为最佳pH值。但有些探针的实际情况并不完全如此,最稳定的探针并不完全代表活性最好,这要靠实验验证。

在确定最佳pH值后,最后要确定最小蛋白量,即能够形成稳定探针的蛋白的最小量。如果在制备探针时加入太多的蛋白,不仅造成浪费,而且更为严重的是容易造成探针凝聚,并严重影响标记活性。

因为探针溶液中的游离蛋白容易抢先与标记位点结合,起到“封闭”(Blocking)作用,而胶体金探针标记不上。在标记位点希少、被标记物含量较少的情况下要特别注意。

胶体金具有很高的动力学稳定性,在稳定因素不受破坏时自身凝聚极慢,可放置数年不发生凝聚。影响稳定的因素主要有

电解质、溶胶浓度、温度、非电解质等。金溶胶必须有少量电解质作稳定剂,但浓度不宜过高。

高浓度亲水性非电解质能剥去胶粒外面的水化膜使其凝聚。

少量的高分子物质促使溶胶凝聚,但一定量的高分子物质反而可增加溶胶稳定性,如蛋白质、葡萄糖、PEG20000等的加入有良好的稳定效果。

当金溶胶吸附蛋白质后,溶胶的稳定性随溶液pH而变化,而这种变化又取决于吸附蛋白质的等电点,如ConA,过氧化物酶等,当pH较低时保持稳定,提高pH则显得不稳定,接近等电点或略高时又变得稳定了。

标记后的胶体金溶液可用0.2~0.5mg/mlPEG20000 作为稳定剂。在4~10℃贮存数月有效,不宜冰冻。贮存中可能会发生程度不同的凝聚,可离心除去。

六、lh胶体金检测是什么?

lh胶体金检测就是利用早孕试纸进行检测。

具体的检测做法是:在正常的月经周期推后一周,用专用的量杯接适量晨尿,取出测试纸,用滴管吸2到3滴尿液滴在试纸白色的一端,注意尿液不宜滴得过多,然后将试纸平放一分钟等待检测结果。

如果试纸显示一条红杠,则为阴性,证明没有怀孕,试纸显示两条红杠为早孕。

七、胶体金标记技术原理?

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。

由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。

现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域。

八、胶体金法属于什么检测方法?

胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金也是免疫电镜技术中较为理想的免疫标记物

九、胶体金法检测步骤怎么查看?

胶体金法检测步骤包括样品制备、胶体金试剂的制备、反应过程、结果观察等几个步骤。

首先是样品制备,将需要检测的样品制成适合胶体金试剂反应的形式;

然后是胶体金试剂的制备,按照一定比例将胶体金试剂制备好;

接着进行反应过程,在一定条件下将样品和胶体金试剂反应;

最后观察结果,通过观察颜色变化或者其他指标来判断样品中是否含有目标成分。整个过程需要严格按照标准操作,才能得到准确的检测结果。

十、胶体金试剂盒原理?

结合垫处预先喷涂上胶体金标记的新冠病毒抗原,为胶体金与新冠病毒抗原(比如重组刺突蛋白)结合体。

胶体金中心为金原子凝聚成的金颗粒,周围吸附了一层负离子,使得胶体金带负电,可以结合在蛋白质上作为标记,且不影响蛋白质的活性。

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