平板划线法原理？

一、平板划线法原理？

　　平板划线法，平板划线分离法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。有时这种单菌落并非都由单个细胞繁殖而来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。

二、平板划线法用什么划线？

划线操作：

(1) 挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。

(2) 划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁)，右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内)，以防止杂菌的污染。

(3) 划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区(菌源区)将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。

恒温培养：将划线平板倒置，于37℃（或28℃）培养，24hr后观察。

三、平板划线法的方式？

1．融化培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基放入水浴中加热至融化。

2．倒平板：待培养基冷却至50℃左右，按无菌操作法倒2只平板(每皿约15m1)，平置，待凝固。 倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管(瓶)塞(也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中)。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15m1，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。

3．作分区标记在皿底将整个平板划分成A、B、C、D四个面积不等的区域。各区之间的交角应为120℃左右（平板转动一定角度约60℃），以便充分利用整个平板的面积，而且采用这种分区法可使D区与A区划出的线条相平行，并可避免此两区线条相接触。

4．划线操作 (1)挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。 (2)划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯(这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁)，右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内)，以防止杂菌的污染。 (3)划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区(菌源区)将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。

5．恒温培养：将划线平板倒置，于37℃（或28℃）培养，24hr后观察。

四、平板划线法和涂布平板法的区别？

一、用处不同

1、涂布平板法：用于某些成品检定、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。

2、平板划线法：用来培养小型菌落。

二、方式不同

1、涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。

2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

五、稀释涂布平板法和平板划线法的区别？

一、用处不同

1、涂布平板法：用于某些成品检定、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。

2、平板划线法：用来培养小型菌落。

二、方式不同

1、涂布平板法：将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。

2、平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

六、倒平板和平板划线法的区别？

在培养微生物时会产生水，对微生物的生长有一定负面影响，所以倒置培养目的是避免冷凝水滴落在培养基上，冲散培养菌落，造成计数不准确。

平板划线法一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞，通过在分区的平板表面上作多次划线稀释，形成较多的独立分布的单个细胞，经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。

七、平板划线法，稀释涂布平板法属于？

平板划线法是通过平板划线而获得微生物纯培养物的方法。是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。

稀释涂布平板法的优点在于可以计数，可以观察菌落特征。缺点是吸收量较小，较麻烦，平板干燥效果不好，容易蔓延。

八、平板划线法为啥要首尾？

首，是为了杀死接种环上的细菌，尾，是为了防止接种环上的细菌污染环境

九、用平板划线法进行分离纯化对划线的要求？

第二次划线从第一次划线的尾部开始，并且最后一次划线不能和第一次划线相连。

十、划线法的基本原理？

划线法（Streaking）是一种细菌的分离或接种方式。

划线法（Streaking）是一种细菌的分离或接种方式。这种方法的学名“Streaking”的原意是指裸奔，用来形容当细菌以这种方法在平板上分离后，细菌会像某些大学的迎新活动那样“围着校园裸奔”。 当划线法用于细菌分离或稀释时，会称为划线平板分离法或平板划线分离法；而当用于接种之时，称为划线平板接种法。利用划线法，可以简便的把已稀释的细菌纯化。