cck8实验原理？

一、cck8实验原理？

细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。

其基本原理为：该试剂中含有WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】。

在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物（Formazan dye）。

生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法,可替代传统的MTT法。

二、cck8实验的目的？

1.细胞增殖测定：细胞增殖实验在很多领域都会用到，比如肿瘤相关、损伤后修复等。

2.药物筛选：在测定一个药物的毒性和安全有效浓度时，经常会用到CCK-8。

3.细胞毒性测定：这个可以和各个处理因素对细胞活性和增殖的影响，比如在UV、低氧或者什么化学物品对细胞的影响上。

4.微生物对细胞的毒性或增殖的实验。

三、cck8详细实验步骤？

方法/步骤分步阅读

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先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞到培养板内。

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按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每个浓度建议3-6个复孔。

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接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。）

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在96孔板中接种细胞悬液（100μL/孔）。将培养板放在培养箱中预培养一段时间（37℃,5% CO2），向每孔加入10 μL CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数），将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

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用酶标仪测定在450nm处的吸光度。若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。

总结：

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1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。

2、按比例 ( 例如:1/2比例 ) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度。

3、建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。

注意事项

如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基。

当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

四、cck8实验结果怎么统计？

cck8实验结果需要按照以下步骤统计： cck8实验结果需要使用光度计测量各组的发色团含量，根据实验对照组的数据进行比较，得出各样本组的细胞活性情况。cck8试剂将注入的化学物质CCK8还原成紫色形成水溶性产物，这种产物可以与细胞中的代谢产物进行染色反应，形成底物色素，用光度计测量产物的吸光度，可反映细胞活性的高低。cck8试剂在细胞培养、细胞毒性、细胞凋亡等领域都有广泛应用，而且使用方便，灵敏度高，可以用于高通量筛选和评价药效等。在统计实验结果时，建议进行多次重复实验，使用统计学方法进行分析，以提高实验结果的可靠性和有效性。

五、cck8实验培养基需要预热吗？

需要预热。因为cck8中的有效成分对于温度要求非常敏感。所以最好先37度预热。

六、实验内容等于实验原理吗？

并不一样——

实验内容是实验进行的过程，包括实验目的、实验器材、实验步骤。

其中，实验目的是实验所要达到的目标。如探究单摆周期与摆长、小球质量以及振幅的关系（或验证单摆周期与摆长的二次方根成正比）。

实验器材一般指做实验所需的材料或药品。

实验步骤是实验具体的实施，包括提出问题、分析问题、指定计划、实施计划、得出结论、表达交流。

实验原理是自然、社会科学中具有普遍意义的基本规律，对实验的进行具有指导作用。

以质壁分离的实验举例，它的原理是：当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁分离。

七、滑轮实验的实验原理？

1、滑轮实验的实验原理是W有用＝Gh（提升重物）=W总－W额=ηW总。

2、滑轮是一个周边有槽，能够绕轴转动的小轮，固定在一个支架上组成的机械。

3、滑轮有两种：定滑轮和动滑轮，组合成为滑轮组。定滑轮工作不省力也不费力，但可以改变作用力方向，使工作更加便利。动滑轮是位置不固定的滑轮，使用时整个滑轮发生位移，使用这种滑轮可以省力。

八、PC实验的实验原理？

一．实验要求：利用CPTH 实验仪上的K16..K23 开关做为DBUS 的数据，其它开关做为控制信号，实现程序计数器PC的写入及加1 功能。

二．实验目的：1、了解模型机中程序计数器PC的工作原理及其控制方法。2、了解程序执行过程中顺序和跳转指令的实现方法。

三．实验电路：PC 是由两片74HC161构成的八位带预置记数器，预置数据来自数据总线。记数器的输出通过74HC245(PCOE)送到地址总线。PC 值还可以通过74HC245(PCOE_D)送回数据总线。

九、cck8什么颜色？

CCK8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。

CCK-8试剂盒通过采用水溶性四唑盐WST-8 实现快速检测，其原理是WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料。通过比色，可以动态地量化活细胞的数量，从而对细胞增殖或药物毒性进行检测。

CCK-8溶液可直接加入到细胞中，不需要与其它组分预混，操作方便，检测准确。

十、cck8优缺点？

CCK8检测细胞增殖/毒性的原理

　WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】属于MTT的升级产品，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。

　CCK-8的优点：

　使用方便快捷，省去了洗涤细胞，不需要放射性同位素和有机溶剂；CCK-8法的检测灵敏度很高，甚至可以测定较低细胞密度；CCK-8法的重复性优于MTT法；CCK-8法对细胞毒性小；CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液，毋需预制，即开即用。

CCK-8的缺点：

与MTT法相比，CCK-8和XTT的价格比较贵。CCK-8试剂的颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色接近，不注意的话容易产生漏加或多加。