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提取DNA加氯仿后怎么分辨是水层还是酚?

时间:2024-07-01 02:02|来源:未知|作者:admin|点击:0次

一、提取DNA加氯仿后怎么分辨是水层还是酚?

如果你是说酚氯仿瓶子里的,那上层是含有饱和TRIS的水层,下层是酚氯仿。

如果是指酚氯仿加入到DNA后混匀离心后的分层,那上层是水相,中间可能含有一点蛋白是白色的一小层,最下层是有机相。

二、苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理是通过有机溶剂抽提,去除蛋白,多糖,酚类等杂质,再加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

使用苯酚抽提细胞DNA时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用。

用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。

蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。

氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。

最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚。(酚易溶于氯仿中)

用酚-氯仿抽提细胞基因组DNA时,通常要在酚-氯仿中加少许异戊醇,为什么?

因为异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。

异戊醇可以降低表面张力,从而减少气泡产生。

另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

三、dna抽提液是什么?

主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!

四、抽提装置原理?

索氏抽提器就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶剂,萃取效率又高。

利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶剂萃取索氏抽提装置效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管上升,被冷凝后滴入提取器中,溶剂和固体接触进行萃取,当溶剂面超 过虹吸管的最高处时,含有萃取物的溶剂虹吸回烧瓶,因而萃取出一部分物质,如此重复,使固体物质不断为纯的溶剂所萃取、将萃取出的物质富集在烧瓶中。

对于有机化学反应A+B⇌C+H2O,在反应可逆进行时,如将生成的水及时从体系中除去

将抽提器安装妥当,然后将装有试样的滤纸筒置于抽提管内,同时注入溶剂至虹吸管高度以上,待其流净后,再加至虹吸管高度三分之一处,用一小块脱脂棉轻轻塞入冷凝管上口,打开冷凝管水管,开始加热抽提。

加热温度控制在每分钟回流索氏抽提装置的溶剂为120-150滴,每小时回流7次以上,抽提的时间须视试样及含油率高低而定,一般约4-8小时及以上,抽提至抽提管内的乙醚用玻璃片检查(点滴试验)无油迹为止。

五、苯抽提工艺原理?

1. 石油化工科学研究院开发的抽提蒸馏工艺采用主溶剂加专用助溶剂的复 合溶剂体系,一方面提高了原料适应性,可处理高、低芳烃含量的馏分油;另一方面提高了芳烃收率。

2. 苯抽提装置采用环丁砜抽提蒸馏工艺,利用溶剂对原料中各组分相对挥 发度影响的不同,通过精馏实现芳烃与非芳烃分离。溶剂和C6馏分在抽提蒸馏塔接触形成气液。

3. 流程简述 预分馏 预分馏部分主体设备为1台脱C6塔(C-801)。预分馏部分的原料为来自重整装置的脱戊烷油。

六、乒乓球提抽原理?

1、向上划。

2、球在上升期间向上跳跃。如果此时棋盘垂直站立,球击中棋盘后向上跳跃。这是因为如果用力击球,板应该向前倾斜并压低弧线,以确保球过网后不会出界。

3、高冲程。

4、球在高点期间水平移动。如果此时板垂直立起,击球的反弹球也水平移动,所以击球板垂直是合理的。

5、下降期。

6、球掉了下来。如果此时木板直立,球碰到木板后会掉下来,即使球还在下,但向下的线更平。

7、进攻球:

8、上升期,进攻球要求板前倾,向前发力。因为板子前倾,自然会有摩擦力,球会有弧线。因此,在上升期击球不需要过大的向上力量。我们通常在上升期长时间练习进攻球的基本功。

9、在高点进攻球,以保证弧线(弧线的作用是在过网后使球落到对手的台面上。球板前倾有一些摩擦力比较好,但是挥杆方向要有一些向上的力。

七、马歇尔抽提试验基本原理?

马歇尔试验是确定沥青混合料最佳油石比的试验。其试验过程是对试件在规定的温度和湿度等条件下标准击实,测定沥青混合料的稳定度和流值等指标,经一系列计算后,分别绘制出油石比与稳定度、流值、密度、空隙率、饱和度的关系曲线,最后确定出沥青混合料的最佳油石比。

八、求几种植物总DNA抽提方法和优缺点?

1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。

2、SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。

3、简易“一管法”提取方法:

4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。

5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多酚多糖去除效果好,但操作步骤较多。

九、蛋白质的抽提的一般原理和方法是什么?不是蛋白质的提取?

蛋白质的抽提和纯化分离一般是分开的。蛋白质抽提的原理是从适当处理后含有蛋白质的生物组织液中加入酸碱或者金属盐使得蛋白质变性析出。方法一般是匀浆,加入适当的缓冲液和金属盐溶液等等。纯化蛋白质可以使用电泳的方法。

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